Kit de prueba de viabilidad celular CellTiter-Fluor™

de citotoxicidadpara la investigación médicade proteasa

Múltiplex con muchos otros ensayos luminiscentes La normalización de los datos para el número de células vivas hace que los resultados sean más comparables con otros datos Cómo funciona el ensayo El ensayo de viabilidad celular CellTiter-Fluor™ es un ensayo de fluorescencia no lítico de adición de reactivo único que mide el número relativo de células viables en una población. El ensayo se basa en la medición de una actividad de proteasa conservada y constitutiva dentro de las células vivas y, por lo tanto, sirve como biomarcador de la viabilidad celular. La actividad de la proteasa en células vivas está restringida a células viables intactas y se mide utilizando un sustrato peptídico fluorogénico permeante a las células (Gly-Phe-AFC). El sustrato entra en las células intactas, donde es escindido por la actividad de la proteasa de células vivas para generar una señal fluorescente proporcional al número de células vivas. La proteasa de células vivas se inactiva al perder la integridad de la membrana y filtrarse al medio de cultivo circundante. Multiplexación con CellTiter-Fluor™ Assay El ensayo CellTiter-Fluor™ también puede utilizarse en un formato multiplex secuencial de un solo pocillo con otras químicas de ensayo posteriores para normalizar los datos por número de células. Los datos del ensayo pueden servir como control interno y permitir la identificación de errores resultantes de la aglutinación de células o de la citotoxicidad del compuesto. En los datos del ejemplo de la derecha, la ionomicina y el PMA trabajan de forma cooperativa para estimular la expresión génica dependiente de NFAT; sin embargo, una mayor concentración de ionomicina provoca una disminución de la expresión. Al monitorizar simultáneamente la viabilidad con el ensayo CellTiter-Fluor™, se demuestra que la disminución de la expresión se debe a una disminución de las células viables.