Ensayo de caspasas de alta sensibilidad: requiere menos células y menos enzimas
Protocolo sencillo de adición-mezcla-medida-sin preparación de muestras
Fácilmente escalable a formatos de placa de 96, 384 y 1.536 pocillos
El ensayo homogéneo mide la actividad de la caspasa-3/7
El ensayo Caspase-Glo® 3/7 proporciona un sustrato proluminiscente de caspasa-3/7 DEVD-aminoluciferina y una luciferasa termoestable patentada en un reactivo optimizado para la actividad de la caspasa-3/7, la actividad de la luciferasa y la lisis celular. La adición del reactivo único Caspase-Glo® 3/7 en formato "añadir-mezclar-medir" produce la lisis celular, seguida de la escisión del sustrato por la caspasa. Esto libera aminoluciferina libre, que es consumida por la luciferasa, generando una señal luminiscente "tipo resplandor" que es proporcional a la actividad de la caspasa-3/7.
La luciferasa estabilizada y el sistema tampón patentado mejoran el rendimiento del ensayo en una amplia gama de condiciones de ensayo, y es menos probable que el ensayo se vea afectado por la interferencia de compuestos que los ensayos basados en fluorescencia o colorimetría. El ensayo de la actividad de la caspasa está diseñado para su uso con formatos de placa de múltiples pocillos utilizando enzima purificada o células en cultivo y puede multiplexarse con otros ensayos basados en células. La alta sensibilidad permite utilizar el ensayo Caspase-Glo® 3/7 en sistemas de cultivo celular 3D. El ensayo proporciona excelentes valores de factor Z en modelos celulares y de enzima purificada.
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