Esta tinción es útil para la detección de trofozoitos móviles de las especies de Entamoeba
NARANJA DE ACRIDINA (TAMPONADA CON ACETATO)
La adición de naranja de acridina a un concentrado fecal pone de manifiesto las barras cromídicas de Entamoeba coli, Entamoeba histolytica/dispar y Entamoeba hartmanni, que presentan una fluorescencia verde brillante.
AURAMINA FENOL (LEMPERT)
Método
1. Hacer frotis fecales como para ZN y fijar en metanol.
2. Teñir con Auramina-Fenol (Lemperts) durante 10 - 15 minutos.
3. Aclarar bien con agua del grifo.
4. Decolorar en alcohol ácido (como para ZN).
5. Aclarar abundantemente con agua del grifo.
6. Retener con permanganato potásico al 0,1% durante 30 segundos.
7. Aclarar bien con agua del grifo y dejar secar al aire. No secar, muchas marcas de papel secante son fluorescentes
Los ooquistes aparecen como discos amarillos brillantes sobre un fondo oscuro.
SOLUCIÓN DE TINCIÓN DE CAMPO A Y SOLUCIÓN B
N.B. Ambas soluciones están listas para su uso y no deben ser diluidas.
Esta técnica es un método rápido de tinción de Field, que permite la tinción rápida de películas delgadas fijadas de varias muestras clínicas. Este método en particular es muy útil para teñir películas de heces no formadas, exudados fecales, aspirados duodenales, etc.
Método
1. Hacer una película fina de heces/exudado y dejarla secar.
2. Fijar en metanol durante 1 minuto.
3. Inundar el portaobjetos con 1 ml de Field's Stain B .
4. Añadir inmediatamente un volumen igual de Field's Stain A, mezclar bien en el portaobjetos y dejar que se tiña durante 1 minuto.
5. Aclarar bien con agua del grifo y escurrir en seco.
6. Examinar la película utilizando el objetivo de inmersión en aceite y el aceite de inmersión
Resultados
Núcleos de parásitos y estructuras que contienen cromatina - rojo
Citoplasma - gris azulado
Núcleos de leucocitos - púrpura
Levaduras y bacterias - azul oscuro
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