Las células madre embrionarias (ES) son células pluripotentes derivadas de la masa celular interna del blastocisto. Las células madre pueden mantenerse in vitro durante periodos prolongados sin perder su capacidad de diferenciarse a todos los linajes celulares cuando se reimplantan de nuevo en un blastocisto. Las células madre embrionarias pueden diferenciarse in vitro en diversos tipos celulares, como progenitores neuronales, musculares, endoteliales y hematopoyéticos. Las condiciones generales de cultivo están bien establecidas y suelen requerir que las células madre embrionarias crezcan sobre una capa inactiva de células alimentadoras o con componentes de la membrana basal (Matrigel, fibronectina, laminina). Cuando se cultivan células madre embrionarias, uno de los parámetros más importantes es el mantenimiento de las células en estado indiferenciado. El cribado previo del suero es esencial antes de utilizarlo para el cultivo de células madre embrionarias. Se analizan varios lotes de sueros para el crecimiento de células madre embrionarias humanas utilizando MEF como capa de alimentación. Para el cribado se miden los siguientes parámetros:
Morfología de la colonia de células madre embrionarias humanas
Eficacia de la siembra
Tasa de diferenciación: análisis del marcador de superficie de las células madre embrionarias humanas expresado en la membrana de las células indiferenciadas (análisis FACS).
Los resultados se utilizan como indicación de la calidad de los sueros para el crecimiento y mantenimiento de células madre indiferenciadas.
Descongelación
Recomendamos descongelar el suero a 2-8ºC. Sin embargo, si es necesario, puede descongelar el suero a temperatura ambiente. Agite suavemente los frascos para mezclar el suero durante el proceso de descongelación.
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