Reactivo RNzol LS
----Kit de extracción de ARN total de muestra de sangre/líquido (columna giratoria)
Descripción
El reactivo RNzol LS es un reactivo listo para usar para el aislamiento del ARN total de la sangre entera y otras muestras líquidas. El reactivo, una solución monofásica de fenol y guanidina es otiocianato, es una mejora del método de aislamiento de ARN de un solo paso desarrollado por Chomczynski y Sacchi. Durante la homogeneización de la muestra o los lisados, el reactivo RNzol LS mantiene la integridad del ARN, a la vez que altera las células y disuelve los componentes celulares. La adición de cloroformo, seguida de la centrifugación, separa la solución en una fase acuosa y una fase orgánica. El ARN permanece exclusivamente en la fase acuosa. Después de la transferencia de la fase acuosa, el ARN se recupera por precipitación con alcohol isopropílico. Tras la eliminación de la fase acuosa, el ADN y las proteínas de la muestra pueden recuperarse por precipitación secuencial.
El ARN total aislado por el reactivo RNzol LS está libre de contaminación de proteínas y ADN. Puede utilizarse para el análisis de Northern blot, la hibridación de dot blot, la selección de poli(A)+, la traducción in vitro, el ensayo de protección de la RNasa y la clonación molecular. Para su uso en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se recomienda el tratamiento del ARN aislado con DNasa I de grado de amplificación cuando los dos cebadores se encuentran dentro de un solo exón.
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