Gold Reverse Transcriptase es una nueva transcriptasa inversa obtenida porin vitroevolución molecular basada en M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase.La primera hebra de cDNA se puede sintetizar a 37~55°C.Gold Reverse Transcriptase ha mejorado significativamente la sensibilidad, la especificidad, la estabilidad térmica y la vida media, lo que es muy adecuado para la transcripción inversa de plantillas de ARN con estructura secundaria compleja.Gold Reverse Transcriptase tiene una mayor capacidad de polimerización y extensión, que se puede utilizar para la síntesis de ADNc largo y la construcción de una alta proporción de biblioteca de ADNc de longitud completa.
tuliendreDdefinición
Se usó poli (rA)·Oligo (dT) como molde/cebador.A 37 °C durante 10 min, la cantidad de enzima requerida para agregar 1 nmol de dTTP como sustancia insoluble en ácido se definió como 1 unidad de actividad (U).
qcalidadCcontrolar
Detección de residuos de exonucleasa: se incubaron 200 U de este producto y 50 pmol de sustrato de ADN monocatenario a 37 °C durante 16 h, y la banda de electroforesis de ADN no cambió después de la electroforesis PAGE de desnaturalización.
Detección de residuo de endonucleasa: 200 U de este producto y 0,3 μg de ADN de pBR322 se incubaron a 37 °C durante 4 h, y las bandas de electroforesis de los plásmidos no cambiaron por electroforesis en gel de agarosa.
Detección de residuos de RNasa: el producto de 200 U y 1 μg de ARN de células 293 se incubaron a 37 ° C durante 30 min, y la banda de electroforesis de ARN no se modificó mediante electroforesis en gel de agarosa.