Reactivo enzima A018 series

enzima UDGde RT-qPCRde bacterias

La enzima termogénica UDG (uracilo-ADN glicosilasa) se examina, extrae y purifica de bacterias cultivadas en laboratorio y, de forma similar a la UNG de E. coli, hidroliza los enlaces uracilo-glicosido en el ADN de cadena simple o doble, extirpa el uracilo y produce sitios sin base sensibles a los álcalis en el ADN. Estos sitios sin base pueden ser hidrolizados por la endonucleasa del ácido nucleico, el calentamiento o el tratamiento con álcali y, a diferencia de la UNG de E. coli, la enzima presenta una baja estabilidad térmica, por lo que es más probable que se inactive. Dependiendo de cómo se prepare el ADN, las enzimas UDG se pueden utilizar para conseguir la escisión del ADN-U en un sitio común específico o en una cadena específica. Definición de unidad Una unidad se define como la cantidad de uracilo-ADN glicosilasa necesaria para degradar completamente 1 μg de uracilo-ADN monocatenario purificado (M13) en 60 minutos a 37°C.【Características del producto】 Se pueden hidrolizar sitios de U-ADN en ADN monocatenario y bicatenario, se pueden extirpar enlaces glicosídicos de uracilo y se pueden producir sitios libres de bases sensibles a los álcalis en el ADN. ♦ Es activo tanto para el ADN monocatenario como bicatenario. ♦ Inactivo para el ARN y el ADN naturalmente libres de uracilo. ♦ No hay requisitos para los iones metálicos y es totalmente activo en presencia de EDTA. Sin embargo, la actividad residual en sistemas que superan los 100mM de K+ o Na+ es aproximadamente el 70% de la actividad original y se requiere un mayor uso. ♦ La temperatura óptima de reacción es 37 ° C, pero tiene mejor actividad en un amplio rango de 20-50 ° C, y 95 ° C puede ser completamente inactivado a los 2 minutos. ♦ La cantidad recomendada de uso en PCR es 0,2U-1U/25μl, y la cantidad recomendada de uso en RT-qPCR de un solo paso y 55-65 ° C no es más de 0,2U/25 μl,