- Síntesis de ADNc de primera cadena
- Activo a 42~55℃. Óptimo a 50℃
- RNasaH negativo
- Rendimiento superior en la RT-PCR
- Alta procesabilidad (hasta 12 kb)
La HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase, una variante termoestable y RNasa H negativa de la RTasa M-MLV, puede sintetizar ADNc a partir de plantillas de ARN purificadas en un rango de temperatura de 42℃ ~ 55℃ y presenta la mayor actividad a 50℃. A temperaturas más elevadas, la síntesis de ADNc mejora en parte debido a la menor formación estructural interna del ARN molde y al aumento de la actividad de polimerización de la RTasa. La alta procesabilidad y productividad de la HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase permite a esta enzima amplificar el alto rendimiento del producto y puede sintetizar ADNc del gen diana hasta 12 kb a partir del ARN molde.
- Aplicación
Generación de ADNc de primera cadena
RT- PCR, PCR en tiempo real
Análisis de extensión de cebadores
- Contenido
HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase (200 unidades/㎕)
Tampón de reacción 5X
0.1 M DE DTT
Mezcla de dNTPs 10 mM (cada uno de 10 mM)
- Control de calidad
La actividad de síntesis de ADNc de la HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase se evalúa mediante un método de RT-PCR de dos pasos. Los ADNc de primera cadena se sintetizaron utilizando ARN total humano y cebadores oligo-d(T) de acuerdo con el protocolo. Se llevó a cabo una reacción de PCR utilizando los cDNAs sintetizados como plantilla de PCR, conjuntos de cebadores correspondientes a los distintos tamaños de la transcripción de la dineína humana y la polimerasa HelixAmp™ Xtender-Taq.
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