Polimerasa de ADN de arranque en caliente con una estabilidad única de 30 días a temperatura ambiente para sus necesidades diarias de PCR.
Una versión de arranque en caliente químicamente modificada de la Taq ADN polimerasa termoestable FIREPol®. Esta enzima se activa únicamente mediante preincubación a 95°C, evitando cualquier actividad inespecífica de la polimerasa a temperaturas más bajas durante la preparación de la reacción.
Mayor especificidad y sensibilidad.
Formación reducida de dímeros de cebadores.
Preparación de la reacción y envío sin hielo.
Descripción
HOT FIREPol® es una ADN polimerasa FIREPol® modificada químicamente. Está inactiva a temperatura ambiente y se activa mediante un paso de incubación de 15 minutos a 95°C. Esto permite el arranque en caliente de la PCR y minimiza los errores de cebado y extensión debidos a cebadores y diluyentes de cebadores no recocidos específicamente. Recomendado para aplicaciones rutinarias (fragmentos de hasta 5 kb).
Posee actividad 5′→3′ polimerasa y 5′→3′ exonucleasa, así como actividad transferasa terminal no dependiente de cebadores, pero carece de actividad 3′→5′ exonucleasa (corrección de pruebas), lo que hace que el producto generado sea adecuado para la clonación TA.
La fidelidad de HOT FIREPol® es similar a la de una Taq ADN polimerasa normal (tasa de error por nucleótido aprox. 2,5 x10-5).
Propiedades
Concentración: 5 U/µl
Arranque en caliente: sí, activado por un paso de incubación de 15 min a 95°C
Precisión aprox. 4 x 104
La vida media estimada a 95ºC es de 1,5 horas.
Almacenamiento y tampón de dilución: 50% glicerol (v/v), 20 mM Tris-HCl pH
Origen: Purificada a partir de una cepa de E.coli portadora de un plásmido superproductor que contiene un gen modificado de la ADN polimerasa de Thermus aquaticus.
Reactivos suministrados
HOT FIREPol® ADN Polimerasa
HOT FIREPol® 10x Tampón B1
HOT FIREPol® 10x Buffer B2
25 mM MgCl2
10x Solución S
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