Este producto contiene la enzima de tapado del virus vaccinia, la 2'-O-metiltransferasa de la estructura de tapado del ARNm y otros componentes de la reacción de tapado, que pueden utilizarse para la modificación del tapado 5' del ARN producido por la transcripción in vitro T7 (JT101).
En eucariotas, después de la transcripción para formar el ARNm original, es necesario formar una estructura de tapón especial en el extremo 5'. Esta estructura desempeña un papel importante en la estabilidad, el transporte (salida) y la traducción del ARNm. La modificación del capping del extremo 5' del ARN mediante la reacción enzimática de las enzimas capping es un método sencillo y eficaz: La enzima capsuladora de Vaccinia puede unir el cap 7-metilguanilato (m7Gppp, Cap0) al extremo 5' del ARN para formar ARNm m7Gppp5'N (Cap0-ARNm). El ARNm Cap 2 '-O-metiltransferas utiliza CAP0-ARNm como sustrato y SAM (S-adenosina metionina) como donante de metilo para metilar 2' -oh del primer nucleótido del extremo 5' de cap0-mrna adyacente a la estructura cap para formar Cap1-ARNm.
La estructura Cap1 puede mejorar la estabilidad del ARNm, lo que ayuda a mejorar su capacidad de expresión en experimentos de transfección celular y microinyección.
Este producto utiliza la enzima capsuladora del virus vaccinia y la Cap-2'-O-metiltransferasa de ARNm al mismo tiempo en la reacción de capsulación, de forma que la reacción de capsulación puede completarse en la misma reacción. El producto de la reacción es Cap1-ARNm, y la eficiencia de tapado puede ser cercana al 100% en la orientación correcta del tapón.
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