Este método se ha modificado a partir de las tinciones Diff-Quick y Wright-Giemsa recomendadas por la OMS. Está destinado al examen de tinción de la morfología de espermatozoides, citología de espermatozoides y citología de próstata.
Principio:
Las proteínas con diferentes puntos isoeléctricos en los espermatozoides y las células tienen diferentes cargas bajo el mismo pH y por lo tanto se unen selectivamente a diferentes tinciones. El amido liberado de las proteínas acidófilas lleva cargas positivas y se une a la tinción ácida (Eosina) para teñirse de rojo. Los carboxilos liberados de las proteínas basófilas tienen cargas negativas y se unen a la tinción alcalina (azul de metileno) para teñirse de azul. Las proteínas neutrófilas, cuyas cargas positivas del amido liberado son equivalentes a las cargas negativas de los carboxilos liberados, se unen simultáneamente a la tinción ácida y a la tinción alcalina, y aparecen de color malva. Sin embargo, como las cargas liberadas son iguales, la tinción es débil. El tampón puede evitar la interferencia de sustancias ácidas y alcalinas para obtener un resultado satisfactorio.
Métodos:
Centrifugar el esperma licuado durante 8 minutos (500 rpm) y eliminar el sobrenadante. Lavar el precipitado con solución salina isotónica 2~3 veces durante 5 minutos cada una (2.000 rpm). Para la muestra con muchos espermatozoides, tomar los espermatozoides licuados del fondo del tubo, lavar y centrifugar con solución salina isotónica 2~3 veces.
Añadir solución salina isotónica para resuspender el precipitado del centrifugado después del lavado. Empujar en rodajas según el método de empuje de la película de sangre. Secar al aire o con ventilación.
Cubrir el frotis con 1~2 gotas de Tinción A durante 15~20 segundos (la tinción puede secarse en este momento).
Lavar la mancha A con tampón fosfato M/15, luego tirar el tampón brevemente.
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