ABScript II cDNA First Strand Synthesis Kit contiene dos mezclas optimizadas, ABScript II Enzyme Mix y ABScript II Reaction Mix. La mezcla enzimática combina la transcriptasa inversa ABScript II y el inhibidor de la RNasa, y la mezcla de reacción contiene un tampón optimizado. La transcriptasa inversa ABScript II es una transcriptasa inversa recombinante de M-MuLV con actividad reducida de RNasa H y mayor termoestabilidad. Puede utilizarse para sintetizar ADNc de primera cadena a temperaturas más altas que la M-MuLV de tipo salvaje. La enzima es activa hasta 48°C, lo que proporciona una mayor especificidad y un mayor rendimiento de ADNc.
El kit también proporciona dos cebadores optimizados para la transcripción inversa y agua libre de nucleasas. Un cebador Oligo-dT anclado [d(T)23VN] obliga al cebador a anillarse al principio de la cola de poliA. La Random Primer Mix optimizada proporciona sitios de cebado aleatorios y consistentes que cubren la totalidad de las plantillas de ARN, incluidos tanto los ARNm como los ARN no poliadenilados. El producto de ADNc de primera cadena generado es de hasta 10 kb.
Características del producto
La baja actividad de la RNasa H es beneficiosa para la síntesis de ADNc de fragmentos largos, pudiendo sintetizar ADNc de hasta 10 KB.
La temperatura óptima de la enzima fue de 42℃ y la enzima sigue teniendo una alta actividad a 48℃.
El rendimiento específico de ADNc fue superior al de la transcriptasa inversa M-MLV ordinaria (37℃).
Adecuado para la detección de coronavirus;
Con una variedad de cebadores RT, tanto ARNm y ARNnc se pueden utilizar como plantillas de transcripción inversa.
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