Opal™ es un flujo de trabajo práctico para la detección simultánea de hasta 6 biomarcadores tisulares más la contratinción nuclear, en una sola imagen. El método es similar a la inmunohistoquímica estándar y es accesible para muchos laboratorios en los que se realiza el desarrollo de métodos IHC estándar. Los paquetes de reactivos Opal Fluorophore independientes le permiten elegir la cantidad y el diseño de biomarcadores de su panel.
El Opal 780 Reagent Pack es una reacción en dos partes y forma parte del flujo de trabajo de portaobjetos completos de 7 colores Phenoptics 2.0. El paquete de reactivos contiene
Opal TSA-DIG, 1 vial
Opal Polaris 780, 1 vial
Dimetilsulfóxido (DMSO), 1 x 100 uL
Los usuarios deben adquirir los anticuerpos primarios y otros reactivos de flujo de trabajo por separado. El envase contiene suficiente reactivo para teñir hasta 50 portaobjetos. Generalmente, se necesitan 100-300 µL de Opal Working Solution por portaobjetos.
Protocolo de reconstitución y dilución de Opal TSA-DIG:
Disolver el reactivo Opal TSA-DIG en 75 uL de DMSO.
Antes de cada procedimiento, diluya Opal TSA-DIG en 1X Plus Diluyente de Amplificación para tinción manual o 1X Plus Diluyente de Amplificación para automatización para hacer Opal TSA-DIG Solución de Trabajo. La proporción de dilución recomendada es 1:100.
Protocolo de reconstitución y dilución de Opal 780:
Disolver el reactivo Opal 780 en 300 uL de ddH2O.
Antes de cada procedimiento, diluir Opal 780 en Diluyente de Bloqueo/Ab para hacer Opal 780 Solución de Trabajo. La proporción de dilución recomendada es de 1:25.
Los paquetes de reactivos Opal se pueden utilizar para tinciones tisulares mono y multiplex y se han configurado y validado para la obtención de imágenes en el sistema de imágenes patológicas cuantitativas PhenoImager HT (anteriormente Vectra® Polaris™).
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