El kit Muse® Autophagy LC3-Antibody based proporciona una solución cuantitativa para el estudio de la autofagia. Este kit contiene dos reactivos de detección clave para facilitar la monitorización de LC3-II lipidada en un sistema celular dado, y funciona mediante:
Emplea una solución de permeabilización selectiva para discriminar la LC3 citosólica de la LC3 autofágica extrayendo las proteínas citosólicas solubles mientras protege la LC3, que ha sido secuestrada en el autofagosoma
Utilizar un reactivo de detección de autofagia (Autophagy Reagent A) para prevenir la degradación lisosomal de LC3, permitiendo su cuantificación por citometría de flujo
El kit Muse Autophagy LC3-Antibody incluye un anticuerpo monoclonal de ratón anti-LC3 conjugado con Alexa Fluor® 555 para medir y rastrear los niveles de LC3 dentro de la célula. El anticuerpo anti-LC3 conjugado con Alexa Fluor® 555 y los reactivos que permiten la autofagia han sido cuidadosamente evaluados para asegurar un rendimiento óptimo, aliviando la necesidad de cualquier validación adicional de los reactivos del kit. Además de los reactivos A y B, este kit incluye un tampón de ensayo para proporcionar a los investigadores una solución completa para el análisis de la autofagia. Los reactivos de detección de la autofagia y el anticuerpo se han optimizado conjuntamente para ofrecer una forma fiable de medir y discriminar entre LC3 citosólica y lipidada, proporcionando mediciones precisas del proceso autofágico. Los datos generados utilizando el analizador celular Guava® Muse® junto con el módulo de software Muse correspondiente proporcionan valores estadísticos, midiendo:
Valor medio de autofagia (para muestras de control y de ensayo)
Índice de inducción de la autofagia (fluorescencia de la muestra de ensayo en relación con el control)
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