La cromatografía de afinidad de iones metálicos inmovilizados (IMAC), desarrollada por Porath et al (1), se basa en la interacción de determinados residuos proteicos (histidinas, cisteínas y, en cierta medida, triptófanos) con cationes de metales de transición. La resina quelante de cobre está diseñada específicamente para la purificación de proteínas que se asocian con iones de cobre (2-3), incluidas las proteínas 6x marcadas con histidina.
Resina de cromatografía de afinidad de metales inmovilizados (IMAC) que utiliza cobre (Cu2+) para la purificación de proteínas marcadas con 6x histidina.
Esta resina se une a seis residuos de histidina (6x His), una etiqueta común utilizada en la purificación de proteínas. La resina consiste en iminodiacetato acoplado a perlas de agarosa reticuladas al 6%. El iminodiacetato une iones de cobre divalentes con una capacidad de 20-40μmoles Cu2+/ml de resina. La capacidad de unión a proteínas es >50mg de proteína por ml de resina. Hemos demostrado la unión de >100mg de una proteína de 50kDa marcada con 6XHis a un ml de resina.
También disponemos de resinas quelantes de níquel, cobalto y zinc inmovilizadas. El cobalto tiene la selectividad más alta, seguido del zinc, el níquel y el cobre, pero tiene la capacidad de carga más baja. El Cobre tiene la mayor capacidad de carga, seguido del Níquel y luego el Zinc.
Se dispone de tampones específicos de unión/lavado y elución.
Características
Para la purificación de proteínas de unión a cobre, incluidas proteínas His 6x
Alta capacidad >50mg/ml
Densidad del ligando: 20-40μmoles Cu2+ /ml resina
Estructura de la microesfera: agarosa reticulada al 6
Aplicaciones
Purificación por afinidad de proteínas de unión al cobre
Purificación por afinidad de proteínas con una etiqueta His 6x.
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