Reactivo solución tampón FOCUS™

de electroforesisde proteínasde urea

Una de las consideraciones más importantes antes de realizar la electroforesis en gel 2D es la elección de los tampones de solubilización de proteínas. Un tampón adecuado debe solubilizar las proteínas eficazmente, sin alterar la carga nativa de las proteínas. La urea, un caótropo común, se utiliza ampliamente para la solubilización y desnaturalización de proteínas. Uno de los inconvenientes del uso de urea es la carbamilación. En el agua, la urea existe en equilibrio con el cianato de amonio, cuyo nivel aumenta al aumentar la temperatura y el pH. El cianato reacciona con los grupos α-amino y ε-amino de las proteínas e induce un cambio en el punto isoeléctrico de las proteínas. Esto conduce a resultados artificiales. Por lo tanto, debe evitarse la carbamilación Una forma de minimizar el riesgo de carbamilación es preparar los reactivos a base de urea frescos antes de cada uso. G-Biosciences ha desarrollado una serie de tampones de solubilización secos, a base de urea, premezclados y listos para usar. Simplemente añada un volumen apropiado del tampón de rehidratación suministrado al tampón seco. A continuación, utilizar para solubilizar proteínas, ahorrando tiempo y mejorando la calidad de la electroforesis en gel IEF/2D (Patente pendiente). Los tampones de extracción FOCUS™ también están diseñados para utilizarse como tampones de rehidratación para tiras IPG Los FOCUS™ Extraction Buffers son concentraciones optimizadas experimentalmente de agentes críticos, tamponadores y estabilizadores, incluyendo urea, tiourea, Nonidet® P-40, CHAPS y sulfobetainas. Los tampones de extracción FOCUS™ están diseñados para producir una extracción óptima de proteínas y mejorar la resolución de las manchas para el análisis de geles 2D.