Kit de reactivos solución tampón SMART-Seq® HT

de ácidos nucleicospara secuenciación de ADNpara síntesis de ADNc

El kit básico SMART-Seq HT (SS-HT) y el kit SMART-Seq HT PLUS (SS-HT PLUS) son kits de fácil automatización que utilizan cebado oligo(dT) para generar ADNc completo de alta calidad directamente a partir de 1-100 células o 10 pg-1 ng de ARN total. Además del kit básico de síntesis de ADNc, el kit SS-HT PLUS también incluye un kit de preparación de bibliotecas y placas de índice dual único (UDI) de un solo uso para generar bibliotecas de secuenciación compatibles con Illumina, lo que lo convierte en una solución completa de principio a fin. El kit de síntesis de ADNc SS-HT cuenta con un protocolo simplificado optimizado para trabajar aguas abajo de FACS y reduce el tiempo de trabajo en comparación con los kits SMART-Seq v4, gracias a la introducción de un cómodo paso combinado de transcripción inversa y amplificación por PCR. La tecnología central SMART (Switching Mechanism at 5' End of RNA Template) que impulsa la síntesis de ADNc proporciona una cobertura de transcripción de longitud completa, lo que la convierte en una potente herramienta para estudiar la expresión génica en células individuales, incluidas las uniones de empalme y el empalme alternativo. El cebado con oligo(dT) se utiliza para amplificar específicamente el ARNm a partir de ARN total de alta calidad (RIN >8) o de células intactas. La tecnología LNA mejora la eficacia del cambio de molde, lo que aumenta el número de genes identificados en comparación con otros métodos. El kit SS-HT PLUS incorpora nuestra química patentada de preparación de bibliotecas, que utiliza fragmentación enzimática y adaptadores stem-loop para construir bibliotecas de alta calidad compatibles con Illumina a partir del ADNc sintetizado con el kit básico. Este flujo de trabajo en dos pasos tiene lugar en un único tubo y puede completarse en unas dos horas, sin necesidad de pasos intermedios de purificación.