Reactivo enzima GspSSD

ADN polimerasaspara amplificación isotérmicakit LAMP

Mastermix original de OptiGene para amplificación isotérmica - sólo tiene que añadir la plantilla y los cebadores. Contiene la nueva GspSSD LF ADN polimerasa propiedad de OptiGene. Velocidad de amplificación superior. Adecuada para la amplificación isotérmica rápida de ADN. La actividad nativa de la transcriptasa inversa permite la RT-LAMP de una sola enzima. Se amplificó una diana de ADN (VKORC1) a partir de ADNg humano (Sigma). las reacciones LAMP de 25μl se realizaron a 65ºC durante 60 minutos en un termociclador en tiempo real (Roche LC-480) por duplicado. El "Tiempo hasta el resultado" se define como el tiempo en el que el valor de fluorescencia de la amplificación alcanza un umbral del 10% de la fluorescencia máxima. Las Mezclas Maestras Isotérmicas de OptiGene (ISO-001 e ISO-004) fueron comparadas con el Kit WarmStart LAMP (DNA & RNA) de NEB [Lote:0021609]. ISO-001 e ISO-004 NO contienen una enzima específica de transcriptasa inversa (RT). Para una comparación real con la mezcla de NEB (que contiene una enzima de transcriptasa inversa separada y específica) se añadieron 0,5U de AMV-RT a las reacciones de OptiGene Master Mix (ISO-001 inc. RT e ISO-004 inc. RT). También se compararon las reacciones estándar ISO-001 e ISO-004 RT-LAMP para demostrar la excelente actividad de transcriptasa inversa inherente a la mezcla. Se amplificó una diana de ARN (Beta-actina) a partir de ARN total humano (Ambion). las reacciones RT-LAMP de 25μl se realizaron a 65ºC durante 60 minutos en un termociclador en tiempo real (Roche LC-480) por duplicado. El "Tiempo hasta el resultado" se define como el tiempo en el que el valor de fluorescencia de la amplificación alcanza un umbral del 10% de la fluorescencia máxima.