La digestión de pepsina en línea rápida, eficiente y reproducible es fundamental en los experimentos que requieren una mayor cobertura de péptidos. Con la columna de pepsina Enzymate BEH de Waters, se puede incorporar fácilmente la digestión de proteínas en línea en los flujos de trabajo HDX-MS existentes.
La columna de pepsina Enzymate BEH digiere eficazmente proteínas intactas en péptidos en un sistema HDX en línea, normalmente en unos 30 segundos. A continuación, los péptidos obtenidos tras la digestión se retienen en una columna de captura y se vuelven a concentrar en una columna ACQUITY UPLC con partículas de menos de 2 μm para ser eluidos en un espectrómetro de masas de alta resolución.
Descripción general
Lograr una digestión en línea de proteínas de pepsina rápida, reproducible y eficiente, generalmente en 30 segundos
Reducir el tiempo total de preparación de las muestras de proteínas
Optimizar la eficacia de la digestión de proteínas cambiando la temperatura o el flujo
Conectar de forma sencilla al sistema ACQUITY UPLC M-Class con tecnología HDX para caracterizar la proteína de la muestra
Comparar la eficacia de digestión a baja y alta presión
Las partículas de BEH son fuertes desde el punto de vista mecánico y pueden soportar altas presiones continuas y prolongadas al nivel de 10 000 psi. Una comparación de la eficacia de la digestión entre digestiones a presión de 1000 psi (baja) y 13 500 psi (alta) muestra que la columna de pepsina Enzymate BEH de Waters presenta un rendimiento robusto y una mayor eficacia de digestión a una presión más alta.