Fast T4 DNA Ligase es un producto monoenzimático que puede utilizarse para conectar fragmentos de ADN y adaptadores en el proceso de construcción de bibliotecas NGS. El producto ha sido verificado por secuenciación de alto rendimiento y tiene una excelente calidad. Esta enzima tiene una capacidad de ligación altamente eficiente, muy adecuada para la ligación de fragmentos de ácido nucleico complejos, como el adaptador Ω de la plataforma MGI. Se recomienda seleccionar Hieff NGSTM Ultima DNA Ligation Module (Cat#12604) cuyo componente principal es Fast T4 DNA Ligase para los clientes que no necesitan ajustar el sistema.
Definición de la unidad
En un sistema de reacción de ligación de 20 μL, cuando 6 μg de λDNA-Hind Ⅲ se hacen reaccionar a 16℃ durante 30 min, la cantidad de enzima necesaria para dar más del 50% de ligación de los fragmentos de ADN se definió como una unidad (U).
Precauciones
1. La ligasa de ADN T4 es sensible a la desnaturalización física. Al mezclar, invierta suavemente el tubo y agite bien. No agitar enérgicamente;
2. Las enzimas deben almacenarse en una nevera o en un baño de hielo cuando se utilicen, y deben conservarse a -20°C inmediatamente después de su uso;
3. Este producto es SÓLO para uso en investigación
4. Para su seguridad y salud, por favor use batas de laboratorio y guantes desechables para la operación.
Instrucciones
1. Los kits actuales de construcción de bibliotecas de ADN no suelen purificarse tras la reparación de extremos y el tratamiento A-Tailing, y realizan directamente la ligación de adaptadores. Consulte la siguiente preparación para el sistema de reacción. Agitar a fondo en vórtex, centrifugar brevemente e incubar durante 15 min a 20°C.
2. La calidad y la concentración de los adaptadores utilizados afectan directamente a la eficacia de la ligación y al rendimiento de la biblioteca.
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