Este producto es una ARN polimerasa de bacteriófago T7 derivada de la expresión de proteínas recombinantes en Escherichia coli. Cataliza la síntesis 5'→3' de ARN en ADN bicatenario a partir de su secuencia promotora T7 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') y utiliza NTP como sustratos. El ADN de doble cadena con extremos romos lineales o extremos 5'salientes puede utilizarse como plantilla para la ARN polimerasa T7, por lo que los plásmidos linealizados y los productos de PCR pueden utilizarse como plantillas para la síntesis in vitro de ARN.
Nota: G* es la primera base del transcrito de ARN.
Este producto se produce de acuerdo con las normas GMP y se suministra en forma líquida.
Característica
Sintetizar transcripciones largas y transcripciones cortas, el ARN se puede producir 100-200 μg con 1 μg de plantilla de ADN
Mayor rendimiento y fácil manejo
Menos endotoxinas
Se ha comprobado la ausencia de endonucleasas, exonucleasas y RNasas
Aplicación
Preparación de sondas de ARN radiomarcadas
Generación de ARN para estudios de estructura, procesamiento y catálisis del ARN
Control de la expresión mediante ARN antisentido
Especificación
Fuente - E. coli recombinante con gen de ARN polimerasa T7
Temperatura óptima - 37℃
Tampón de almacenamiento - 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100,50% (v/v) glicerina,pH7.9 a 25℃
Definición de unidad - La cantidad de enzima necesaria para incorporar 1 nmol de [3H] GMP en el precipitado insoluble en ácido en 1 hora a 37°C y pH 8.0 se define como 1 unidad.
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