Este producto es una nueva mezcla maestra de PCR en tiempo real a prueba de contaminación y basada en colorantes desarrollada, a partir de la PanProbes™ Universal qPCR MasterMix (Cat. QPD01-0100), mediante la adición de una proporción optimizada de enzimas dUTP y UNG. Contiene concentraciones optimizadas de la ADN polimerasa Hotstart, dNTPs, dUTP, enzima UNG (uracilo ADN glicosilasa), Mg2+, tampón de reacción y estabilizador. En la reacción de PCR, se utiliza dUTP en lugar de dTTP, y la T del fragmento del producto de amplificación se sustituye por la U para formar un producto de amplificación de PCR que contiene bases dU, y la enzima UNG altamente activa puede degradar rápidamente el fragmento de ADN que contiene U en el sistema de reacción, eliminando eficazmente la contaminación residual de los productos de PCR en el medio ambiente y reduciendo en gran medida los falsos positivos causados por la contaminación del producto de amplificación, garantizando así la especificidad y precisión de la amplificación. Este producto es un sistema de reacción de premezcla de PCR en tiempo real 2× a prueba de contaminación y basado en sondas, que sólo requiere añadir la plantilla, los cebadores, la sonda, el colorante de referencia ROX (utilizado según los diferentes instrumentos de PCR en tiempo real) y agua para que su concentración de trabajo sea de 1× para llevar a cabo la reacción. Tiene las ventajas de rapidez y simplicidad, alta sensibilidad, fuerte especificidad y buena estabilidad, lo que puede minimizar el error humano, ahorrar tiempo de operación experimental de PCR y reducir la probabilidad de contaminación.
Prueba de detección de QPD02 en diferentes genes
Utilizando QPD02 para la transcripción inversa en plantillas de ARN porcino diluidas en serie, seguida de qPCR, la curva de amplificación mostró una amplificación eficiente y sensible de diferentes genes.
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