Nuevo fragmento de anticuerpo que se une a las proteínas de fusión GFP
Análisis de proteínas de fusión GFP - en un tubo
Las proteínas de fusión fluorescentes son herramientas populares para estudiar la localización de proteínas y la dinámica celular. Estas construcciones suelen fusionar la totalidad -o al menos un dominio funcional- de una proteína diana con uno de los muchos tipos de proteínas fluorescentes informadoras. Las derivadas originalmente de la medusa A. victoria se conocen como proteína verde fluorescente o GFP. Es fácil obtener imágenes de las células utilizando una construcción de proteína de fusión GFP, aunque para obtener una imagen completa estos datos de imagen se combinan a menudo con información bioquímica adicional de la proteína (o dominio proteico) de interés. Para estos experimentos bioquímicos, se suele diseñar una segunda proteína de fusión con un dominio de "etiqueta" diferente que permita la purificación. Estos análisis in vitro adicionales pueden utilizarse para confirmar la funcionalidad de la construcción de fusión "marcada", así como para extraer complejos multiproteicos que puedan formarse en el medio celular. La falta de reactivos específicos, fiables y eficaces ha limitado el uso de la GFP y las proteínas de fusión fluorescentes relacionadas, tanto en estudios de biología celular como en análisis bioquímicos directos.
Las GFP-Traps utilizan fragmentos de anticuerpos de alpaca de afinidad superalta acoplados a perlas de agarosa o perlas magnéticas de agarosa. Estos "Nanobody-Traps" son perfectos para experimentos de inmuno-precipitación, inmuno-purificación e inmuno-pulldown con una pureza (y rendimiento) hasta 10 veces superior a la de los anticuerpos monoclonales de ratón convencionales. Compatibles con una gran variedad de materiales de partida, los Nanobody-Traps pueden utilizarse con células, tejidos y órganos de mamíferos, bacterias, levaduras e incluso plantas.
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