Reactivo anticuerpos RFP-Trap A

de bioquímicade imágenes celularesde proteínas

Estas construcciones suelen fusionar la totalidad -o al menos un dominio funcional- de una proteína diana con uno de los muchos tipos de proteínas fluorescentes informadoras. Las derivadas originalmente del hongo coral Discosoma sp. se conocen comúnmente como proteína roja fluorescente o RFP. Es fácil obtener imágenes de las células utilizando un constructo de proteína de fusión RFP, aunque para obtener una imagen completa estos datos de imagen se combinan a menudo con información bioquímica adicional de la proteína (o dominio proteico) de interés. Para estos experimentos bioquímicos, normalmente se diseña una segunda proteína de fusión con un dominio de "etiqueta" diferente que permite la purificación. Estos análisis in vitro adicionales pueden utilizarse para confirmar la funcionalidad de la construcción de fusión "marcada", así como para extraer complejos multiproteicos que puedan formarse en el medio celular. La falta de reactivos específicos, fiables y eficaces ha limitado el uso de la RFP y las proteínas de fusión fluorescentes relacionadas, tanto en estudios de biología celular como en análisis bioquímicos directos. Las RFP-Traps utilizan fragmentos de anticuerpos de alpaca de muy alta afinidad acoplados a perlas de agarosa o perlas magnéticas de agarosa. Estos "Nanobody-Traps" son perfectos para experimentos de inmuno-precipitación, inmuno-purificación e inmuno-pulldown con una pureza (y rendimiento) hasta 10 veces superior a la de los anticuerpos monoclonales de ratón convencionales. Compatibles con una gran variedad de materiales de partida, los Nanobody-Traps pueden utilizarse con células, tejidos y órganos de mamíferos, bacterias, levaduras e incluso plantas. Estos reactivos permiten que sus RFP-fusiones sean candidatas perfectas para inmunoprecipitaciones, Co-IP, espectroscopia de masas, mediciones de actividad enzimática y análisis ChIP.