Reactivo en solución NI™

albúmina de suero bovinode laboratoriode proteínas

Protocols.io ofrece una versión interactiva de este protocolo en la que se pueden descubrir y compartir optimizaciones con la comunidad investigadora. Un ensayo colorimétrico de proteínas altamente sensible que supera la interferencia de agentes de laboratorio comunes presentes en soluciones de proteínas y muestra una variación mínima entre proteínas. El ensayo no se ve afectado por la presencia de agentes de laboratorio comunes, como agentes reductores, agentes quelantes, detergentes, aminas, azúcares, caótropos, sales, fármacos, antibióticos, cobalto y otros agentes de laboratorio comunes (véanse las tablas 1 y 2). El NI™ Protein Assay se compone de dos sencillos pasos: Se añade el Agente Precipitante de Proteínas Universal (UPPA™) a las soluciones de proteínas para precipitar rápidamente la proteína total. La proteína se inmoviliza por centrifugación y se descartan los agentes interferentes en el sobrenadante. La concentración de proteína se analiza mezclándola con una solución alcalina que contiene una concentración conocida de sal de cobre; los iones de cobre se unen a la espina dorsal peptídica y el ensayo mide los iones de cobre no unidos (véase la figura 2). El ensayo es independiente de las cadenas laterales de la proteína, lo que minimiza la variación entre proteínas (véase la figura 3). La densidad de color es inversamente proporcional a la cantidad de proteína. El ensayo se suministra con un estándar de proteína tradicional de albúmina de suero bovino (BSA) o un estándar de proteína no animal. Características Respuesta lineal 0,5µg-50µg de proteína Requerimiento de muestra pequeño, sólo 1-50µl No se ve afectado por productos químicos y agentes no proteínicos Duración del protocolo: ~30 minutos Larga vida útil Aplicaciones Estimación de proteínas durante la purificación de proteínas, electroforesis, biología celular, biología molecular y otras aplicaciones de investigación.