Protocols.io ofrece una versión interactiva de este protocolo en la que se pueden descubrir y compartir optimizaciones con la comunidad de investigadores
ProteSEEKER™ identifica tipos específicos de proteasas con un panel de doce inhibidores de proteasas y un sensible ensayo colorimétrico de cribado de proteasas.
ProteSEEKER™ permite a los investigadores examinar sus muestras de proteínas y establecer qué clase específica de proteasas están presentes y, por lo tanto, diseñar un cóctel de inhibidores de proteasas altamente específico utilizando el número mínimo de inhibidores de proteasas. Alternativamente, ProteSEEKER™ puede utilizarse para probar los cócteles de inhibidores de proteasas existentes e identificar sus insuficiencias y, por tanto, complementar con inhibidores de proteasas adicionales.
El ensayo de cribado de proteasas ProteSEEKER™ consiste en una proteína marcada con colorante lista para usar, que es digerida por proteasas para liberar péptidos marcados con colorante. La absorbancia de los mismos se mide para determinar la actividad de la proteasa. Los inhibidores se suministran a una concentración 100X y la concentración 1X proporciona una inhibición >90% en la mayoría de las muestras biológicas.
Protocols.io también proporciona una versión interactiva paso a paso de este protocolo donde se pueden descubrir y compartir optimizaciones con la comunidad de investigadores.
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