Este kit FluoroSpot puede configurarse de muchas maneras - diseñado para el perfilado de células B.
Uso previsto
Este kit FluoroSpot Flex está diseñado para el recuento de células B secretoras de IgM, IgG e IgA de ratón mediante el ensayo FluoroSpot. Con este kit pueden medirse células B que secretan anticuerpos específicos de antígeno, así como células B que secretan anticuerpos independientemente de la especificidad del antígeno. Sólo para uso en investigación. No para uso en procedimientos de diagnóstico.
Para el análisis de células B de memoria, puede ser necesario preactivar las células con R848 e IL-2 recombinante de ratón (ambos incluidos).
Rendimiento
Imágenes de IgM, IgG e IgA de ratón procedentes del análisis de esplenocitos activados in vivo de ratones BALB/c hiperinmunizados (con ovoalbúmina) en FluoroSpot IgM/IgG/IgA. se incubaron 75.000 células/pocillo en la placa FluoroSpot durante 5 horas sin estimulación.
Descripción del analito -
La inmunoglobulina M (IgM) es el primer isotipo de anticuerpo (también llamado clase) secretado por el sistema inmunitario adaptativo en respuesta a un antígeno extraño. Los linfocitos B plasmáticos secretan IgM principalmente en forma de pentámeros, es decir, cinco moléculas de IgM unidas por la cadena J. Dado que la IgM se forma al principio de la respuesta inmunitaria y posteriormente es sustituida por IgG, los anticuerpos específicos de la clase IgM son característicos de una infección reciente, en curso o crónica. Por lo tanto, la IgM representa el isotipo con menor afinidad por los antígenos. No obstante, debido a su estructura, con 10 sitios de unión a antígenos por pentámero de IgM, puede unirse a antígenos unidos a la superficie con una avidez muy elevada. La inmunoglobulina M constituye aproximadamente el 10% de la concentración total de inmunoglobulinas en el suero.
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