Kit de reactivos en solución NZYGigaprep

solución tampónpara transcripción in vitroEscherichia coli

El kit NZYGigaprep permite la preparación rápida de ADN plasmídico de gran pureza a gran escala a partir de cepas de E. coli. Detalles El kit NZYGigaprep está diseñado para la preparación rápida y a gran escala de ADN plasmídico de alta pureza. El kit ha sido optimizado para obtener típicamente de 2 a 10 miligramos de ADN a partir de plásmidos de alto número de copias o de 500 microgramos a 2 miligramos del ácido nucleico a partir de plásmidos de bajo número de copias, todos ellos procedentes de cepas recombinantes de Escherichia coli. Nuestro kit agiliza el proceso con un procedimiento modificado de lisis alcalina/SDS. Este procedimiento prepara el sedimento celular bacteriano para la purificación de plásmidos. Consiste en desnaturalizar tanto el ADN cromosómico como el plasmídico en condiciones alcalinas. A continuación, la introducción de acetato de potasio inicia la formación de un precipitado que contiene ADN cromosómico y otros componentes celulares. Simultáneamente, el tampón de acetato de potasio neutraliza el lisado, permitiendo que el ADN plasmídico vuelva a su estado superenrollado nativo, manteniéndolo en solución. Tras equilibrar la columna con tampón de equilibrio, el ADN plasmídico se une selectivamente a la resina de intercambio aniónico. Con un lavado a fondo de la columna, el ADN plasmídico se purifica eficazmente y queda listo para la elución. Un sencillo paso de precipitación permite recoger el ADN eluido, que puede disolverse fácilmente en tampón TE para su uso posterior. El ADN purificado es adecuado para las aplicaciones de biología molecular más exigentes, como la transfección, la transcripción in vitro, la secuenciación fluorescente automatizada o manual, la clonación, la PCR y la hibridación. Para aislar ADN de plásmidos, BACs o cósmidos con bajo número de copias, duplique los volúmenes de los tampones M1, M2 y M3