El kit de mutagénesis NZYSupreme está diseñado para realizar mutaciones puntuales y eliminar o insertar uno o varios nucleótidos en una secuencia de ADN. El sistema requiere el suministro de dos cebadores de oligonucleótidos sintéticos que contengan la mutación deseada.
Detalles
El kit de mutagénesis NZYSupreme proporciona un método sencillo y muy eficaz para generar mutaciones puntuales o para eliminar/insertar nucleótidos únicos o múltiples en cualquier tipo de ADN plasmídico mediante PCR. Este kit de mutagénesis se ha desarrollado recientemente para reducir el tiempo de trabajoy aumentar la eficacia de la edición del ADN. El sistema requiere el suministro de dos cebadores oligonucleotídicos sintéticos parcialmente complementarios que contengan la mutación deseada. La incorporación de estos cebadores de oligonucleótidos mutados con la polimerasa de ADN Supreme NZYProof, una polimerasa de ingeniería de alta precisión, genera un plásmido mutado que contiene muescas escalonadas, que resiste a la digestión con Dpn I (ya que el ADN sintético no está metilado). Tras el tratamiento con Dpn I, el plásmido mutado resultante se recupera mediante la transformación de células competentes NZYStar. Para una presentación esquemática del protocolo de mutagénesis, véase la Figura 1. El ADN aislado de cepas dam- Escherichia coli, incluidas JM101 y SCS110, no es una plantilla adecuada para la reacción de mutagénesis.
Componentes
- Mezcla maestra Supreme NZYProof 2x incolora
- Dpn I (10 U/µL)
- Plásmido de control
- Mezcla de cebadores de control de mutagénesis
- Plásmido de control de células competentes (0,1 ng/µL) (*)
(*) sólo incluido en el kit MB44702
Información adicional
Condiciones de envío
Hielo seco
Aplicación
Mutagénesis dirigida
Características
Mutagénesis de plásmidos <15 kb; Rápido
Categoría de productos
Clonación y mutagénesis de ADN
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