El kit de síntesis de ADNc de primera cadena NZY M-MuLV es un sistema que incluye todos los componentes necesarios para sintetizar ADNc de primera cadena, excepto el ARN molde.
Detalles
El kit de síntesis de ADNc de primera cadena NZY M-MuLV, oligos separados, es un sistema que incluye todos los componentes necesarios para sintetizar ADNc de primera cadena, excepto el ARN molde. Los hexámeros aleatorios y los cebadores Oligo(dT)18 se suministran en tubos separados para ofrecer la comodidad de elegir el cebador apropiado para iniciar la reacción de transcripción inversa. El ADNc monocatenario resultante es adecuado para su uso en la PCR de transcripción inversa cuantitativa en tiempo real (RT-qPCR). El kit de síntesis de ADNc de primera cadena NZY M-MuLV, oligos separados, está formulado para proporcionar altos rendimientos de productos de ADNc de longitud completa y aumentar la sensibilidad en la RT-qPCR. El material de partida puede oscilar entre 10 pg y 5 µg de ARN total. Además de hexámeros aleatorios y cebadores Oligo(dT)18, el kit incluye NZYRT 2× Master Mix, sin oligos, que contiene dNTPs, MgCl2 y un tampón RT optimizado; 10× Tampón de recocido y NZYM-MuLV RT Enzyme Mix. NZYM-MuLV RT Enzyme Mix incluye tanto NZY M-MuLV Reverse Transcriptase (RNasa H minus) como NZY Ribonuclease Inhibitor para proteger el ARN contra la degradación debida a la contaminación por ribonucleasas. La RNasa H (de E. coli) se suministra en un tubo separado para degradar específicamente el molde de ARN en los híbridos de ADNc-ARN después de la síntesis de ADNc de primera cadena. Este procedimiento mejorará la sensibilidad de las reacciones posteriores de RT-qPCR, ya que los cebadores de PCR se unirán más fácilmente al ADNc.
Componentes
- Mezcla enzimática RT NZYM-MuLV
- NZYRT 2x Master Mix, sin oligos
- 10× Tampón de recocido
- Mezcla de hexámeros aleatorios (50 ng/µL)
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