Aislar ADN plasmídico de baja endotoxina (<1EU/µg) a partir de cultivos bacterianos de hasta 200 ml utilizando columnas spin maxi
Visión general
El E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Maxi Kit proporciona un método eficiente para el aislamiento a gran escala de ADN plasmídico de baja endotoxina. El sistema utiliza jeringas filtrantes de limpieza de lisado en lugar de centrifugación para limpiar rápidamente los lisados bacterianos posteriores a la lisis alcalina. Tras la limpieza del lisado, se eliminan las endotoxinas y el protocolo sigue un sencillo procedimiento de "bind-wash-elute" para obtener ADN plasmídico de alta calidad. Los rendimientos varían según el número de copias del plásmido, la cepa de E. coli y las condiciones de crecimiento. de 50 a 200 mL de cultivos bacterianos en medio LB producen normalmente 0,6-1,2 mg de ADN plasmídico de alto número de copias. Se pueden procesar hasta 500 mL de cultivo cuando se trabaja con plásmidos de bajo número de copias. El sistema utiliza la centrifugación o la tecnología de vacío para la purificación del plásmido y elimina las columnas de flujo por gravedad que requieren precipitación con alcohol y consumen mucho tiempo. El ADN plasmídico purificado es adecuado para aplicaciones posteriores sensibles como la transfección de células de mamífero, la clonación, la secuenciación fluorescente automatizada de ADN (las lecturas típicas superan los 800 pb), la secuenciación de próxima generación, la digestión con enzimas de restricción, la ligación, la PCR, la transcripción in vitro, la transformación, etc.
Rápido - Purificación de ADN plasmídico en < 45min
Seguro - Sin extracciones de fenol/cloroformo
Versátil - Formatos de centrifugación y vacío disponibles
Alta calidad - ADN plasmídico de grado de transfección y bajo en endotoxinas (< 1 EU/µg)
Especificaciones
No debe utilizarse en procedimientos de diagnóstico.
CARACTERÍSTICAS - ESPECIFICACIONES
Aplicación posterior - Transfección, terapia génica, clonación, transcripción in vitro, próxima generación
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