Kit de reactivos en solución E.Z.N.A.®

para PCRde ácidos nucleicospara bacterias

Aislar ADN plasmídico de baja endotoxina (<1EU/µg) a partir de cultivos bacterianos de hasta 5 ml utilizando minicolumnas de centrifugación Visión general Los plásmidos aislados con procedimientos de purificación tradicionales contienen normalmente altos niveles de endotoxinas (también conocidas como lipopolisacáridos o LPS) que pueden interferir significativamente con los experimentos de transfección aguas abajo. Se pueden utilizar hasta 5 mL de cultivos de una noche para plásmidos de alto número de copias y 10 mL para plásmidos de bajo número de copias. El E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Mini Kit I integra un paso eficiente de eliminación de endotoxinas en el procedimiento de purificación de plásmidos para producir plásmidos de grado de transfección de alta calidad (<0,1 EU/µg) para una transfección eficiente. Las células bacterianas se lisan utilizando el método de lisis alcalina-SDS. A continuación, el lisado celular depurado se trata con el reactivo ETR para eliminar eficazmente las endotoxinas. Tras ajustar las condiciones de unión, el lisado celular se aplica a la columna de ADN HiBind® y el ADN purificado se eluye de la membrana de la columna. Rápido - 30 minutos o menos Seguro - Sin extracciones de fenol/cloroformo Versátil - Formatos de centrifugación y vacío disponibles Alta calidad - Endotoxinas eficientemente reducidas (<0.1 EU/µg) Especificaciones CARACTERÍSTICAS - ESPECIFICACIONES Aplicación posterior - Transfección de líneas celulares sensibles; terapia génica, etc. Material de partida - 1-5 ml de cultivo LB con una DO600 entre 2 y 3; o equivalente Tipo de plásmido - ADN cósmido de alta o baja copia Modo de procesamiento - Manual, centrifugación Rendimiento - 1 - 24 Tecnología de fijación del ADN - Minicolumna de centrifugación de sílice Método de limpieza del lisado - Centrifugación Tiempo de procesamiento - <30 minutos Rendimiento - 15-25 µg para alto número de copias; 0,1-5 µg para bajo número de copias Otros - Incluye eliminación de endotoxinas