Kit de prueba para la investigación HTRF

de proteínas totalesde células

Este kit HTRF detecta STAT6 celular y puede utilizarse como ensayo de normalización con nuestro kit fosfo-STAT6 para una lectura óptima de la señalización JAK/STAT. Ver El kit de ensayo celular STAT6 total está diseñado para monitorizar el nivel de expresión de STAT6, ya sea fosforilada o no fosforilada. Es compatible con nuestro kit Phospho-STAT6, y permite el análisis de proteínas fosforiladas y totales de una sola muestra para una mejor lectura de la vía de señalización JAK/STAT. Especificaciones Otras especificaciones Tamaño de la unidad 500 puntos de ensayo Funcionamiento Principio del ensayo STAT6 total El ensayo STAT6 total cuantifica el nivel de expresión de STAT6 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, el ensayo se basa totalmente en placas y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-STAT6 utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo distinto de la proteína. En presencia de STAT6 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor y genera una señal FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra, y proporciona un medio para evaluar la expresión de las proteínas en un formato de ensayo sin lavado. Protocolo de ensayo de STAT6 total en 2 placas El protocolo de 2 placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, a continuación, transferir los lisados a una placa de detección de 384 pocillos de bajo volumen antes de añadir los reactivos de detección HTRF de Total-STAT6. Este protocolo permite controlar la viabilidad y confluencia de las células.