El kit HTRF de IL1 alfa humana está diseñado para la cuantificación de la liberación de IL1 alfa humana en sobrenadante celular.
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También conocida como hematopoyetina 1, la IL1 alfa es una citocina proinflamatoria producida principalmente por macrófagos activados y células epiliales y endoliales. Su función principal es el mantenimiento y la protección de la función de barrera de la piel. En respuesta a la infección, la IL1 alfa estimula la proliferación de fibroblastos, aumenta los neutrófilos sanguíneos y activa la proliferación de linfocitos.
La evaluación de muestras de suero suele requerir una mayor sensibilidad. En algunos casos, los ensayos AlphaLISA pueden tener sensibilidad suficiente para permitir la detección de niveles bajos de analitos en suero o plasma.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:
Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Bajo fondo
Miniaturización directa de microplacas de 96 ó 384 pocillos a ensayos de alta densidad
de alta densidad, como las placas de 384 pocillos de bajo volumen y 1536 pocillos
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o el tamaño de los ensayos
Principio del ensayo
El sobrenadante celular, la muestra o el estándar se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección mediante reactivos HTRF® (placa blanca de bajo volumen de 384 pocillos o placa Revvity de bajo volumen de 96 pocillos en 20 µl). Los anticuerpos marcados con el donante y el aceptor HTRF se mezclan previamente y se añaden en un único paso de dispensación, para agilizar aún más el procedimiento del ensayo. El ensayo puede realizarse en un formato de hasta 1536 pocillos, simplemente cambiando proporcionalmente el tamaño de cada volumen de adición.
Análisis de los datos del ensayo
La curva logística de 4 parámetros (4PL) se recomienda habitualmente para ajustar una curva estándar ELISA.
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