Kit de reactivos en solución 63 series

para PCR en tiempo realde ácidos nucleicosde fosfato

Las mediciones de los niveles de expresión de ARNm -ya sea mediante análisis Northern, protección con ribonucleasas o PCR cuantitativa en tiempo real- suelen estandarizarse comparando los datos con los obtenidos para un gen de referencia interno o endógeno. Los genes de mantenimiento, como la beta-actina y la gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH), se utilizan con mayor frecuencia porque se espera que sus niveles de expresión permanezcan constantes en diferentes condiciones de tratamiento. Desgraciadamente, esta suposición no siempre es válida, y los resultados basados únicamente en genes de mantenimiento pueden estar sesgados (Suzuki, Higgins y Crawford 2000). Un método mejor es normalizar sus datos utilizando nuestro ADNc de referencia humano qPCR, el único ADNc de control derivado enteramente de tejidos humanos. el ADNc de referencia humano qPCR es el control ideal para comparar datos de diferentes experimentos de PCR cuantitativa (qPCR). Dado que se prepara a partir de un pool de ARN total recogido de varios tejidos diferentes, nuestro ADNc de referencia humano qPCR proporciona una amplia cobertura génica, como demuestra el análisis de microarrays del material de ARN de partida. El ARN, y por tanto el ADNc, preparado a partir de tejidos completos proporciona una mejor representación génica con menos variación que el ARN obtenido a partir de líneas celulares (datos no mostrados). Además, el análisis PCR muestra que nuestro ARN total está prácticamente libre de ADN genómico. Esto permite una medición más precisa del número de copias de los transcritos. Tanto los genes de alta como de baja abundancia están bien representados, lo que permite la preparación de una amplia gama de estándares diluidos en serie para cada ensayo de qPCR. La variación entre lotes del ADNc de referencia es mínima porque la fuente de ARN se prepara a escala industrial. Resumen Amplia cobertura génica Prácticamente libre de ADN genómico