El CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time), Ver. 2 permite pasar de células a ADNc listo para su análisis mediante PCR en tiempo real. Cuando se utilizan técnicas convencionales para trabajar con trazas de ácidos nucleicos, la pérdida de producto durante los pasos de purificación es un problema frecuente. Sin embargo, este kit de células a ADNc garantiza un buen rendimiento del producto, ya que no se requieren pasos de purificación de ARN y ADNc que induzcan pérdidas.
El procedimiento comienza con la lisis celular, seguida de una reacción de transcripción inversa con el cebador adaptador dT (RT dT Primer 2) para sintetizar ADNc a partir de ARNm. A continuación, se utiliza la desoxinucleotidil transferasa terminal (TdT) para añadir una cola dA al ADNc sintetizado. La cola 3' dA resultante, que contiene el producto de ADNc, se utiliza como molde directo para la PCR, lo que reduce el número de ciclos de amplificación necesarios.
Además de pasar de células a ADNc, este producto puede utilizarse para amplificar ADNc a partir de cantidades traza de ARN.
El CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time), Ver. 2 utiliza un paso adicional de tratamiento con exonucleasa I, que ayuda a suprimir la amplificación inespecífica derivada del cebador y aumenta el rendimiento de los genes de baja expresión.
Células a ADNc: Kit de amplificación del transcriptoma completo CellAmp para RT-PCR
El CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time), Ver. 2 permite pasar de células a ADNc listo para el análisis por PCR en tiempo real.
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