Reactivo solución de coloración TB (Ziehl-Neelsen)

colorantepara microbiologíapara microscopía

Uso previsto: Para la identificación de bacterias ácido-resistentes del género Mycobacterium, que incluye el Mycobacterium tuberculosis causante de la tuberculosis. Principio: Este kit de tinción se basa en la tinción de Ziehl-Neelsen (una solución de carbolfucsina) recomendada por la OMS. Las bacterias ácido-resistentes como Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium leprae son difíciles de teñir debido a su cápsula lipoide en la pared celular. Sin embargo, una vez que la cápsula lipoide se tiñe con un tinte mejorado como la carbolfucsina, el compuesto recién formado resistirá la decoloración por ácido-alcohol y retendrá el color original teñido (rojo), que puede diferenciarse fácilmente de otros microorganismos que aún absorben la contra-tinción azul. Métodos: 1. Fijar el frotis con llama y luego agregar carbolfucsina. Calentar lentamente y mantener la tinción al vapor durante 5 minutos. Evitar vaporizar hasta secar o hervir. 2. Esperar unos minutos para enfriar, enjuagar suavemente con agua (Secar suavemente la lámina con papel bibuloso) 3. Decolorar durante 2 minutos con ácido-alcohol. 4. Enjuagar suavemente con agua (si el color rojo aún es visible en la superficie de la muestra, agregar ácido-alcohol nuevamente hasta que el rojo esté completamente decolorado). 5. Aplicar azul de metileno durante 30 segundos. Enjuagar suavemente con agua y secar al aire. Examinar la lámina terminada bajo un microscopio. Especificaciones: Contenido: 3 viales de 100 ml/kit, 3 botellas de 250 ml/kit, 3x(6 botellas de 500 ml)/kit Componentes: - Carbolfucsina: 1x100ml, 1x250ml, 6x500ml (Carbolfucsina, Fenol) - Ácido-alcohol: 1x100ml, 1x250ml, 6x500ml (Etanol, Ácido clorhídrico) - Azul de metileno: 1x100ml, 1x250ml, 6x500ml (Azul de metileno) Precaución: 1. Después de cada uso, tapar inmediatamente el frasco de reactivo para evitar la vaporización. 2. Para muestras de esputo, el frotis debe estar adecuadamente engrosado para aumentar la tasa de detección. Para un frotis más grueso, el tiempo de contra-tinción debe controlarse. El examen microscópico se verá afectado si el fondo es demasiado oscuro. 3. Ocasionalmente, la intensidad de la tinción roja puede ser diferente para la misma bacteria ácido-resistente. Notar la diferencia en la intensidad de la tinción roja al observar. 4. Para el almacenamiento del kit, evitar la exposición a temperaturas extremadamente altas o bajas y a la luz solar. 5. Al teñir láminas patológicas ácido-resistentes, se recomienda el método de calentamiento. Para obtener mejores resultados, el tiempo de tinción de la carbolfucsina debe ser superior a 5 minutos. Resultados esperados: Las especies de Mycobacterium ácido-resistentes aparecerán de color rojo brillante, mientras que otras bacterias y células serán azules. Mycobacterium tuberculosis es una bacteria en forma de bastón (bastón recto o curvado) Gram-positiva, de aproximadamente 1,3 a 3,5 µm de largo y 0,3 a 0,5 µm de ancho. No forma flagelos ni esporas. Mycobacterium puede teñirse fácilmente con tinción ácido-resistente. Bajo el microscopio, las bacterias ácido-resistentes pueden aparecer como bastones en grupo, o como partículas al metamorfosearse. A nivel celular inferior, ciertas formas especiales, como "V", "Y" y "T", pueden formarse mediante la unión de 2 a 3 células. - Destinado a la identificación de Mycobacterium ácido-resistentes (por ejemplo, M. tuberculosis) - Método de Ziehl-Neelsen (carbolfucsina), recomendado por la OMS - Contenido del kit: Carbolfucsina, Ácido-alcohol, Azul de metileno (volúmenes variados) - Precauciones: Tapar las botellas después de su uso, controlar el tiempo de contra-tinción, evitar temperaturas extremas, método de calentamiento recomendado - Resultado esperado: Las bacterias ácido-resistentes se tiñen de rojo, las demás de azul