Los estándares de cuantificación de bibliotecas NGS con cebadores PCR (para la plataforma illumina) se desarrollaron para la cuantificación de la concentración de bibliotecas NGS para la plataforma de secuenciación illumina. Se compone de estándares de biblioteca (seis diluciones de 10 veces) y una mezcla de cebadores.
La cuantificación de la biblioteca NGS de las moléculas amplificables es crítica para la calidad de los datos de secuenciación. Una concentración adecuada de la biblioteca maximizará la capacidad de secuenciación. Una concentración deficiente de la biblioteca da lugar a una densidad de clústeres baja o alta en la celda de flujo, lo que puede provocar una baja capacidad de secuenciación.
No es preciso medir la concentración de la biblioteca NGS con métodos estándar de cuantificación del ADN, como el espectrofotómetro o el fluorómetro. QPCR es el mejor método para la cuantificación de bibliotecas con alta consistencia y reproducibilidad de la cuantificación de bibliotecas.
Nuestro reactivo es un método de cuantificación basado en PCR en tiempo real de alta sensibilidad, diseñado específicamente para bibliotecas NGS que utilizan la plataforma de secuenciación illumina. La amplificación utiliza secuencias adaptadoras de illumina como cebadores, y sólo se amplificarán las bibliotecas completamente ligadas al adaptador. Por lo tanto, el reactivo proporciona una estimación precisa de la concentración de la biblioteca basada en verdaderas bibliotecas illumina secuenciables. Además, este kit también puede utilizarse para confirmar la reacción de ligación una vez finalizada la preparación de la biblioteca.
Nuestros estándares de cuantificación de bibliotecas son compatibles con los reactivos comerciales de QPCR basados en SYBR Green. Esto lo hace más flexible para los científicos que quieran utilizar su reactivo de PCR en tiempo real. La cuantificación de la concentración de la biblioteca se consigue por comparación con una curva estándar generada a partir de los estándares de biblioteca.
---