Lineal a lo largo de ocho o más órdenes de magnitud de concentración de enzima.
Sensible a 10-20 moles de luciferasa.
Ensayo simple no homogéneo para cuantificar la actividad de la luciferasa de luciérnaga
El sistema de ensayo de luciferasa es un reactivo extremadamente sensible y rápido para la cuantificación de luciferasa de luciérnaga. Se observan resultados lineales en al menos ocho órdenes de magnitud de concentración de enzima, y pueden medirse menos de 10-20 moles de luciferasa en condiciones óptimas. En general, se puede conseguir una sensibilidad 100 veces mayor que con el ensayo de cloranfenicol acetiltransferasa (CAT).
El reactivo de ensayo de la luciferasa genera luz casi constante durante al menos 1 minuto, por lo que el ensayo es compatible con la medición de la luciferasa utilizando un luminómetro de tubo único o un luminómetro de placa de pocillos múltiples con autoinyector. Se prefiere un luminómetro, pero no es necesario, ya que el ensayo se adapta a los contadores de centelleo.
Reactivos de lisis celular utilizados con el sistema de ensayo de luciferasa
El sistema de ensayo de la luciferasa es un ensayo no homogéneo; las células que contienen la luciferasa deben lisarse antes de añadir el reactivo. El tampón de lisis Glo, el reactivo de lisis de cultivos celulares, el tampón de lisis pasiva y el tampón de lisis de reportero pueden utilizarse con el sistema de ensayo de luciferasa para la cuantificación del reportero en células de mamífero. El Reporter Lysis Buffer permite realizar ensayos de luciferasa, CAT y β-galactosidasa a partir del mismo extracto celular. El sistema de ensayo de la luciferasa también puede utilizarse para la cuantificación en células vegetales y bacterianas, pero sólo el reactivo de lisis de cultivos celulares es adecuado para estas aplicaciones.
En algunos kits el tampón de lisis está incluido, y en otros debe adquirirse por separado
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