Kit de reactivos en solución CLindex™

de preparación de bancos de ADNde preparación de bancos de ARN

El kit de multiplexación CLindex™Sample permite agrupar hasta 16 muestras en la misma biblioteca de secuenciación unicelular. La tecnología de multiplexación CLindex™ emplea la química del clic para un etiquetado de muestras eficiente e imparcial. Un grupo químico con una gran afinidad por las proteínas de la superficie celular y un oligo de indexación de la muestra que se une a ese grupo químico etiquetan las células de cada muestra. Una de las principales ventajas del etiquetado basado en la química del clic en comparación con el etiquetado basado en anticuerpos es que las proteínas de la superficie celular reconocidas por la química del clic son abundantes y se encuentran en diferentes especies. Además, el proceso completo de etiquetado de la muestra sólo dura 30 minutos. Flujo de trabajo optimizado Los marcadores de muestras se añaden utilizando la química click antes de agrupar las muestras en un único flujo de trabajo GEXSCOPE®. A continuación, las células agrupadas con etiquetas de muestra se cargan en un SCOPE-chip™ para la lisis celular y el código de barras. La etiqueta de la muestra (15 nt) está flanqueada por un asa de PCR universal y una cola de poli(A), que son capturados por microesferas de oligo-dT. Los tags de muestra se etiquetan con un código de barras celular. Simultáneamente, los ARNm de la misma célula individual también son capturados por las perlas magnéticas oligo-dT en su cola de poli(A) y etiquetados con el mismo código de barras celular, así como con UMI. Así, todos los fragmentos de ADNc de la misma célula tienen un denominador común: el código de barras celular. Tanto el código de barras celular como la etiqueta CLindex garantizan que cada transcripción pueda vincularse a la célula y la muestra de origen. Alta eficacia de etiquetado Cuatro líneas celulares independientes (NB4, THP1, U937 y CCRF) se marcaron con CLindex® y se agruparon en partes iguales antes de la partición celular en el SCOPE-chip®.