El ferrocianuro potásico sirve para teñir la hemosiderina y diferenciarla de otros pigmentos.
Principio:
El hierro de los tejidos (en estado férrico) puede liberarse de las proteínas con ácido clorhídrico diluido. A continuación, reacciona con ferrocianuro potásico para formar ferrocianuro férrico azul, lo que se conoce como la reacción del azul de Prusia.
Métodos:
1. Fijar los tejidos en tampón neutro de formaldehído al 10%. Deshidratar de la forma habitual e incrustar.
2. Desparafinar los tejidos en agua destilada. Volver a enjuagar con agua destilada.
3. Mezclar un volumen igual de ferrocianuro potásico al 2% y ácido clorhídrico al 2%. Dejar caer la mezcla sobre los portaobjetos durante 20~30 minutos. Aclarar con agua destilada.
4. Tinción de contraste en solución Nuclear Fast Red durante 5~10 minutos y enjuague brevemente con agua destilada.
5. Deshidratar en etanol al 95% y etanol absoluto, aclarar en xileno y montar con medio de montaje.
Precaución:
1. Los tejidos deben fijarse con formaldehído neutro tamponado. Si se utiliza formaldehído ordinario, el tejido debe fijarse durante menos tiempo antes de incrustarlo. Los tejidos que se fijan en formaldehído ordinario durante mucho tiempo reaccionan mal. Evite utilizar fijadores que contengan cromato.
2. Es preferible utilizar ácido clorhídrico de grado analítico o superior, ya que el ácido clorhídrico de grado inferior suele contener impurezas de hierro que pueden dar lugar a falsos positivos.
3. Todos los recipientes y utensilios utilizados durante el procedimiento deben estar limpios. Evitar el uso de herramientas de hierro.
4. En los pasos previos a la reacción del hierro, enjuagar sólo con agua destilada para evitar que el hierro del agua del grifo se combine con la sal de calcio de los tejidos, lo que daría lugar a falsos positivos.
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