El tinte negro Sudán está destinado a la tinción de grasa neutra.
Principio:
Se cree que la tinción de lípidos depende de las propiedades físicas de la solución o de la adsorción. Cuando la tinción con Sudan Black se disuelve en disolvente orgánico, presenta una mayor solubilidad en los lípidos del tejido congelado que en los disolventes originales. Así pues, durante la tinción, los colorantes migrarán a los lípidos desde los disolventes orgánicos, lo que dará lugar a la tinción lipídica.
Métodos:
1. Cortar tejido congelado a 6~10μm, enjuagar en agua destilada.
2. Enjuague el tejido en etanol al 50~70% durante 20~30 segundos.
3. Colocar en solución de Sudan Black B durante 3~5 minutos.
4. Diferenciar en etanol al 50~70% durante unos segundos hasta eliminar el color suelto en los portaobjetos.
5. Aclarar con agua destilada.
6. Tinción de contraste en solución Nuclear Fast Red durante 5 minutos.
7. Aclarar en agua destilada durante 1~2 minutos.
8. Elimine el exceso de agua alrededor del portaobjetos y séquelo al aire.
9. Montar con arabinan o gelatina de glicerina.
Precaución:
1. Para visualizar lípidos, tiña tejido congelado, en lugar de tejido parafinado, ya que los lípidos son fácilmente solubles en disolventes orgánicos.
2. El tejido congelado utilizado para la tinción de lípidos no debe ser demasiado fino. De lo contrario, puede perderse el contenido lipídico.
3. La tinción no permanecerá durante mucho tiempo, así que observe y tome fotografías lo antes posible.
---