Este kit de prueba se basa en el inmunoensayo enzimático competitivo para la detección de Diazepam en el pienso, la orina, el hígado y la carne. El antígeno de acoplamiento se recubre previamente en las tiras de micropocillos. El Diazepam presente en la muestra y el antígeno de acoplamiento precubierto en las tiras de micropocillos compiten por los anticuerpos anti-Diazepam. Tras la adición del conjugado enzimático, se añade el sustrato TMB para la coloración. El valor de la densidad óptica (DO) de la muestra tiene una correlación negativa con el Diazepam que contiene. Este valor se compara con la curva estándar y posteriormente se obtiene la concentración de Diazepam.
2. Especificaciones técnicas
Sensibilidad: 0,1 ppb
Límite de detección
Tejido 1 ppb
Orina 1 ppb
Pienso 10 ppb
Tasa de recuperación
Orina 80 ±10
Piensos 75 ±10
Tejidos (carne, hígado) 85 ±10
Tasa de reacciones cruzadas
Diazepam 100%
Nitrazepam 7,6
Oxazepam 8,8
3. Componentes
1) Tiras de micropocillos: 12 tiras con 8 pocillos extraíbles cada una
2) solución estándar 6× (1 mL cada una): 0 ppb, 0,1 ppb, 0,3 ppb, 0,9 ppb, 2,7 ppb, 8,1 ppb
3) Conjugado enzimático (12 mL) tapón rojo
4) Solución de trabajo de anticuerpos (7 mL) tapón azul
5) Solución de sustrato A (7 mL) tapón blanco
6) Solución de sustrato B (7 mL) tapón negro
7) Solución de parada (7 mL) tapón amarillo
8) tampón de lavado concentrado 20× (40 mL) tapón blanco
9) solución de redisolución concentrada 2× (50 mL) tapón transparente
4. Materiales necesarios pero no suministrados
1) Equipamiento: lector de microplacas, impresora, homogeneizador, dispositivo de secado con nitrógeno, votex, centrífuga, pipetas de medición, balanza (recíproca de sensibilidad de 0,01 g).
2) Micropipetas: monocanal de 20 a 100 µl y de 200 a 1000 µl, y multicanal de 250 µl.
3) Reactivos: N-hexano, NaOH, diclorometano (CH2Cl2), CH3CN.
---