EIAgen Total T4 Kit es un inmunoensayo enzimático directo en fase sólida para la determinación cuantitativa de Tiroxina total (T4) en suero o plasma humano. El método puede usarse para medir concentraciones de T4 en un rango de 4 a 300 ng/mL (0.4 a 30 µg/dL).
Introducción
La medición de la concentración sérica de tiroxina se considera generalmente una prueba diagnóstica in vitro importante para evaluar la función tiroidea. Esta importancia ha proporcionado el impulso para la mejora significativa en la metodología de ensayo que se ha producido en las últimas tres décadas. Esta evolución procedimental puede rastrearse desde la prueba empírica del yodo unido a proteínas (PBI) (1) hasta el radioinmunoanálisis teóricamente sofisticado (2).
Esta metodología de inmunoensayo enzimático en microplaca proporciona al técnico una sensibilidad óptima al tiempo que requiere pocas manipulaciones técnicas.
Principio del método
La muestra de suero o plasma se pipetea en el pocillo recubierto con estreptavidina. La adición del conjugado Biotin-T4 (Biotin-T4) y del iniciador de la reacción inmunológica Anti-T4 -HRP conjugate inicia el ensayo competitivo. Durante la incubación inmunológica, la T4 de la muestra compite con el conjugado Biotina-T4 por los sitios de unión anti-T4 del conjugado HRP Anti T4 que, a su vez, se une a los pocillos recubiertos de estreptavidina a través de la fracción de biotina. Tras el lavado de las especies que no reaccionaron, la cantidad del complejo inmunológico permaneció unida a los pocillos
Estreptavidina : Biotina-T4 : Anti-T4-HRP
se revela mediante la incubación con el cromógeno/sustrato. El desarrollo del color azul se detiene con ácido sulfúrico,
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