"Molgen Genetics Haemostatic Disease (ITGA2/FVII) Kit" es un kit de ensayo para la detección del polimorfismo de nucleótido único en los genes ITGA2 y F7 del sistema de coagulación sanguínea mediante PCR en tiempo real con detección de curvas de fusión.
Introducción
el "Molgen Genetics Haemostatic Disease (ITGA2/FVII) Kit" está destinado a la detección del polimorfismo de nucleótido único C807T en el gen ITGA2 (codifica la integrina alfa-2) y G10976A en el gen F7 (codifica el factor de coagulación VII) en muestras clínicas (sangre total, epitelio bucal) utilizando el método de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real con análisis de curvas de fusión.
Los resultados de la genotipificación se tienen en cuenta en la evaluación compleja del riesgo de trombofilia (susceptibilidad a la trombofilia hereditaria).
La extracción de ADN a partir de muestras clínicas puede realizarse utilizando el "Molgen Universal Extraction Kit".
El kit está diseñado para su uso con el ciclador de PCR de tipo bloque CFX96 (Bio-Rad, EE.UU.), como Adaltis AmpliLab
El kit contiene los reactivos necesarios para 48 pruebas, incluidas las muestras de control.
Principio del método
El principio del método se basa en la amplificación de la región de ADN humano seleccionada con la posterior formación de dúplex híbridos del producto de PCR con la sonda de ADN específica y la detección de las curvas de fusión de los dúplex.
El paso de amplificación consiste en ciclos repetidos: desnaturalización a temperatura de la plantilla de ADN, recocido de los cebadores en sitios específicos de la plantilla de ADN y extensión de los cebadores con Taq polimerasa.
Tras el paso de amplificación, se reduce la temperatura y la sonda de ADN específica marcada con fluorescencia se hibrida con el amplicón marcado con quencher, lo que provoca la disminución de la señal fluorescente.
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