Kit de reactivos en solución MOLgen

para PCR en tiempo realclínicoSNP

El kit de reactivos está diseñado para la determinación del polimorfismo de un solo nucleótido del gen MCM6 - 13910C/T mediante PCR en tiempo real con detección de curvas de fusión. Los kits contienen reactivos sólo para PCR en tiempo real. Introducción "MOLgen Genetics MCM6 Kit" está destinado a la determinación del polimorfismo de nucleótido único -13910 C/T en el gen MCM6 (sitio regulador del gen LCT, que codifica la lactasa) en muestras clínicas (sangre total, epitelio bucal) mediante el método de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real con análisis de curvas de fusión. La extracción de ADN de muestras clínicas puede realizarse utilizando el "MOLgen Universal Extraction Kit" fabricado por Adaltis S.r.l. Los resultados del análisis PCR se tienen en cuenta en diagnósticos complejos de enfermedades. El kit está diseñado para su uso con cicladores de PCR de tipo bloque: AMPLIlab (Adaltis), CFX96 (Bio-Rad, EE.UU.). El kit contiene los reactivos necesarios para 48 pruebas, incluidas las muestras de control. Principio del método El principio del método se basa en la amplificación de la región de ADN humano seleccionada con la posterior formación de dúplex híbridos del producto de PCR con la sonda de ADN específica y la detección de las curvas de fusión de los dúplex. El paso de amplificación consiste en ciclos repetidos: desnaturalización a temperatura de la plantilla de ADN, recocido de los cebadores en sitios específicos de la plantilla de ADN y extensión de los cebadores con Taq polimerasa. Tras el paso de amplificación, se reduce la temperatura y la sonda de ADN específica marcada con fluorescencia se hibrida con el amplicón marcado con quencher, lo que provoca la disminución de la señal fluorescente. Durante la fase de fusión, la sonda de ADN se libera, lo que provoca un aumento de la fluorescencia.