Para la determinación cuantitativa de inmunglobulina IgM en suero o plasma humano.
PRINCIPIO DEL MÉTODO
El IgM es un test turbidimétrico cuantitativo para la determinación de IgA en suero o plasma humano. Los anticuerpos IgM antihumanos, cuando se mezclan con muestras que contienen IgM, forman complejos insolubles. Estos complejos provocan un cambio de absorbancia, dependiente de la concentración de IgM de la muestra del paciente, que puede cuantificarse por comparación con un calibrador de concentración conocida de IgM.
REACTIVOS
R1 (DILUYENTE): Tampón Tris 20 mmol/L, PEG 8000, pH 8.3. Azida sódica 0,95 g/L.
R2 (ANTICUERPO): Suero de cabra, IgM antihumana pH 7,5. Azida sódica 0.95 g/L.
CALIBRACIÓN (Opcional)
Se recomienda Calibrador de Proteínas de Suero.
PREPARACIÓN DE REACTIVOS
Los reactivos están listos para su uso.
INTERFERENCIAS
Bilirrubina (20 mg/dL), hemoglobina (10.0 g/dL), lipemia (5g/L) no interfieren. El factor reumatoide puede interferir a 900 IU/mL.
PROCEDIMIENTO
Longitud de onda : 340 nm(320-360 nm)
Temperatura de trabajo : 37°C
Recorrido óptico : 1 cm
Tipo de ensayo : Turbidimetría
Dirección : Creciente
1. Llevar los reactivos y el fotómetro (soporte de cubetas) a 37°C.
2. Ajustar el instrumento a cero con agua destilada. 3. Pipetear en un tubo de ensayo.
4. Mezclar y leer la absorbancia (Abs.1) tras la adición de la muestra o del calibrador.
5. Pipetear en un tubo de ensayo
6. Mezclar bien y leer la absorbancia (Abs.2) de los calibradores y de la muestra exactamente 2 minutos después de la adición de R2.
CÁLCULO
Calcular la diferencia de absorbancia (Abs.2-Abs.1) de cada punto de la curva de calibración y representar gráficamente los valores obtenidos frente a la concentración de IgM de cada dilución de calibrador.
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