Para la determinación cuantitativa de UREA en suero. . Sólo para uso diagnóstico in vitro.
Metodología
Talke y Schubert introdujeron en 1965 un procedimiento totalmente enzimático utilizando ureasa y glutamato deshidrogenasa. El presente procedimiento se basa en una modificación de su método.
Preparación de reactivos
Preparar el reactivo de trabajo mezclando 4 partes de reactivo 1 con 1 parte de reactivo 2 (por ejemplo, 200 µl de R1 con 50 µl de reactivo R2)
Deterioro del reactivo
El reactivo no debe utilizarse si el reactivo de trabajo tiene una absorbancia en blanco de reactivo inferior a 1,0 a 340 nm.
Precauciones
1. Este reactivo es para uso exclusivo en diagnóstico in vitro.
2. Evite la ingestión del reactivo, ya que aún no se ha determinado su toxicidad.
3. Los reactivos contienen azida sódica (0,2%) como conservante
Recogida y almacenamiento de muestras
1. Se recomienda el suero.
2. No debe utilizarse plasma que contenga anticoagulantes.
3. Todo el material que entre en contacto con la muestra debe estar libre de amoníaco y metales pesados. 5. Todas las muestras de sangre deben considerarse potencialmente infecciosas.
Materiales necesarios pero no suministrados
1. Dispositivos de pipeteo precisos. (10ul y 1.0ml)
2. Temporizador. (Capaz de medir intervalos de 30 y 60 segundos)
3. Tubos de ensayo
4. Espectrofotómetro con cubeta de temperatura controlada capaz de medir a 340 nm
PROCEDIMIENTO
Longitud de onda : 340 nm
Temperatura : 37°C
Recorrido óptico : 1 cm
Tipo de ensayo : Tiempo fijo
Dirección de la reacción : Decreciente
1. Llevar a temperatura ambiente ( 15 -30 °C)
2. Poner el fotómetro a 0 (cero ) con agua destilada.
Limitaciones
Las muestras con valores superiores a 250 mg/dL deben diluirse con solución salina al 0,9% 1:1, volver a analizarse y multiplicar los resultados por dos.
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