Kit de prueba de tuberculosis cobas® MTB-RIF/INH

de diagnósticoMycobacterium tuberculosisde Chlamydia trachomatis

Descripción
cobas® MTB-RIF/INH para uso en los sistemas cobas® 5800/6800/8800 es una prueba diagnóstica in vitro cualitativa automatizada que emplea PCR en tiempo real para la detección directa de mutaciones asociadas a resistencia a rifampicina en el gen rpoB y mutaciones asociadas a resistencia a isoniazida en los genes katG e inhA de Mycobacterium tuberculosis a partir de muestras respiratorias humanas. La prueba está prevista como ensayo reflex junto con cobas® MTB y, junto con cultivos y pruebas de sensibilidad, como ayuda en el diagnóstico de M. tuberculosis multirresistente (MDR-TB).

Uso previsto
Para el análisis de esputo crudo, y esputo digerido/descontaminado (N-acetil-L-cisteína/NaOH) y muestras de lavado broncoalveolar (BAL) que hayan sido positivas para MTBC por cobas® MTB.

Principio / Método
La licuefacción e inactivación de las micobacterias se realizan con cobas® Microbial Inactivation Solution (MIS), seguida de sonicación. Los sistemas cobas® 5800/6800/8800 realizan la preparación de la muestra completamente automatizada (extracción y purificación de ácidos nucleicos), amplificación por PCR en tiempo real, detección y asignación automática de resultados (positivo, negativo, inválido).

Preparación y extracción de muestras
La liberación de ácidos nucleicos se consigue mediante disrupción química (MIS, cobas® omni Lysis Reagent), enzimática (proteasa) y física (sonicación). Los ácidos nucleicos liberados se unen a la superficie de sílice de partículas de vidrio magnéticas añadidas; las impurezas y los inhibidores de PCR se eliminan mediante lavados y el ácido nucleico purificado se eluye a temperatura elevada.

PCR y detección
Se emplean cebadores específicos para las regiones diana. Las sondas específicas de mutación, marcadas con fluoróforos, permiten la detección simultánea del complejo MTB, las mutaciones de resistencia a rifampicina y a isoniazida en cinco canales de detección (las mutaciones de rifampicina se detectan en tres de los canales). La mezcla maestra contiene dUTP (en lugar de dTTP) y AmpErase (uracil-DNA glycosylase) para controlar la contaminación por arrastre. La detección en tiempo real mide la fluorescencia de los reporteros durante la PCR.

Dianas detectadas

• Complejo MTB (diana genómica monocopia)
• Mutaciones asociadas a resistencia a rifampicina (gen rpoB) — 18 mutaciones detectadas
• Mutaciones asociadas a resistencia a isoniazida (gen katG y región promotora inhA) — 7 mutaciones detectadas

Instrumentos previstos / flujo de trabajo
Destinado al uso en cobas® 5800, cobas® 6800 y cobas® 8800. Los sistemas proporcionan manipulación automatizada de muestras, extracción de ácidos nucleicos, amplificación por PCR, detección e informe automático de resultados.

Información de pedido
Número de material | Descripción del material
09040617190 | KIT COBAS 58/68/8800 MTB-RIF/INH 192T

Aviso regulatorio
Para uso diagnóstico in vitro.